抗体水解片段:在一定条件下,Ig分子肽链的某些部分易被蛋白酶水解为不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是很常用的两种Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的结构和功能,分离和纯化特定的12多肽片段。木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在铰链区二硫键连接的两条重链的近N端,可将Ig裂解为两个完全相同的Fab段和一个Fc段。Fab段即抗原结合片段(fragment antigenbinding,Fab),由一条完整的轻链与重链的VH和CHl结构域组成。一个Fab片段为单价,可与抗原结合但不产生凝集反应或沉淀反应;Fc段即可结晶片段(fragment crystallizable,Fc),由Ig的CH2和CH3结构域组成。Fc段无抗原结合活性,是Ig与效应分子或细胞相互作用的部位。单克隆抗体的制备要求高精度的实验操作。广州IgM抗体基因
抗体的多样性:每种基因片段是以多拷贝的形式存在,其中编码重链V区的VH、DH和JH的基因片段数分别为50、23和6个;编码K轻链V区的Vx和JK基因片段数分别为60和5个,编码入轻链V区的VX和J入基因片段数分别为30和7个。这些基因在胚系阶段以分隔的形式存在。在B细胞的分化发育过程中,这些基因片段发生重排和组合,从而产生数量巨大、能识别特异性抗原的BCR。每种具有特异性BCR的B细胞克隆可识别相应的抗原,产生一种特异性抗体。Ig基因重组是B细胞合成无数特异性抗体的主要原因。河南Prestige Antibodies抗体怎么购买多克隆抗体可以用于检测特定蛋白质在不同组织和细胞中的表达情况。
单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。(2)体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现,极大提高了抗体的生产量。
抗体(antibody,Ab):是由抗原进入机体刺激B细胞分化增殖为浆细胞而合成并分泌的一类能与相应抗原发生特异性结合并产生免疫效应的含有糖基的球蛋白。抗体分布于体液(血液、组织液及粘膜的外分泌液)中,主要存在于血清内。1964年世界卫生组织召开会议,将具有抗体活性及化学结构与抗体相似的球蛋白统称为免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。免疫球蛋白除分布于体液中之外,还可存在于B细胞膜上。现代免疫学认为,抗体与免疫球蛋白是等同的概念;只是抗体侧重于其生物学活性的描述,而免疫球蛋白侧重强调其化学结构。多克隆抗体可以通过融合细胞和单克隆化技术转变为单克隆抗体。
抗体独特的生物学活性使其在疾病的诊断、免疫防治及基础研究中发挥作重要作用。早在19世纪后期,人们就开始使用特异性抗原免疫动物制备相应的抗血清。1975年,Kohler和Milstein建立了单克隆抗体(monoclonai antibody,mAb)技术,使规模化制备高特异性、均质性抗体成为可能。然而,鼠源性mAb在人体反复免疫后出现的人抗鼠抗体(human anti-mouseantibody,HAMA)很大程度上限制了mAb的临床应用。近年来,随着分子生物学的发展,人们已经可以通过抗体工程技术制备人一鼠嵌合抗体、人源化抗体或人源抗体。单克隆抗体的研究有助于开发个体化的医疗方案。合肥IgA抗体价格
多克隆抗体具有更普遍的抗原特异性,可以同时识别多个不同的抗原分子。广州IgM抗体基因
IgE主要来源于呼吸道、消化道黏膜下的浆细胞,是一种亲细胞性抗体,与反应、寄生虫病与皮肤过敏有关。另有一种能与某种过敏原特异性结合的IgE,称特异性IgE,对过敏性喘症的诊断,其特异性强、敏感性高,对寻找变应原有重要意义。血清免疫球蛋白E(IgE) 正常值为0.1-0.9mg/L。总IgE强阳性,特异性IgE阴性。异常结果:血清中过敏原特异性IgE水平只能说明个体对已测过敏原的敏感性。但不能只依靠检测血清中的过敏原特异性IgE水平,而必须结合临床病史和其它诊断手段才能确诊过敏症。 需要检查的人群:患者属过敏性体质,对过敏原特异性检测项不敏感。广州IgM抗体基因
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