分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc式中 :A 为吸光度;I0为入射的单色光强度;I 为透射的单色光强度;T 为物质的透射率;k 为摩尔吸收系数;L 为被分析物质的光程,即比色皿的边长;c 为物质的浓度;物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。江西超微量分光光度计核酸检测
宝予德超微量分光光度计使用时注意小贴士:(1)测量前将样品中度混匀(可采用震荡器或用手指弹震管底)(2)移液器吸头插入液面下吸取样品,可避免吸入气泡;TIP头贴着下光纤表面打出样品,且只按到移液器***挡尽头,第二挡不要按,可以避免吹出气泡到样品中。(3)每次测量完毕后,用蒸馏水清洁上下光纤端面,这样可以更好地保证下一次测量的准确性(主要针对超高浓度样品,一般样品无此要求)。(4)每次做空白检测前一定要先用水清洁上下光纤表面,可保证空白检测准确。(5)每次测量的核酸样品量建议为1-2微升,蛋白样品建议2微升。 过少可能无法形成水柱,过多可能溢出。(6)加样后尽快测量,以防蒸发浓缩以及灰尘落入,已加样品不能多次检测,如需重测需重新滴加同一样品。(7)仪器避免阳光直射,避免强风吹拂,以避免蒸发。(8)连续测量一段时间后擦净样品,用水清洁上下光纤表面,然后用水或缓冲液进行重新空白后再检测。(9)清洁光纤端面(上样基座)时必须用洁净质软的实验室用纸(擦镜纸等)进行轻轻擦拭。安徽性价比高超微量分光光度计样品检测BCA法的原理是蛋白在碱性溶液里与Cu2+形成紫色化合物,吸收峰在562nm波长。
测试在紫外区有吸收的样品时用石英比色皿,测试只在可见光区有吸收的样品时使用玻璃比色皿。石英比色皿在可见和紫外光区没有吸收,而玻璃比色皿在紫外区有吸收,所以不能用于紫外光区。对于一般的非光学专业人员,用眼睛是不能分开的两种比色皿的。但是两者硬度差别很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(***值)几十倍,如果把两个对磨,石英比色皿将很少被磨损,而玻璃比色皿磨损非常大。由于石英比色皿的透光范围从0.12-4.5微米,***的谱段范围内没有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4-4微米,且有许多离子吸收峰。所以,石英比色皿要比玻璃比色皿优越的多,化验数据更准确、更可靠。A230是碳水化合物较高吸收峰的吸收波长。
超微量分光光度计已成为现代分子生物实验室常规仪器。江西超微量分光光度计核酸检测
物质的吸收光谱:如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱,它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失,这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱。不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质。当光线通过某种物质的溶液时透过的光的强度减弱,因为有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光被组成此溶液的物质所吸收只有一部分光可透过溶液。入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光 + 透过光。如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的损失则:入射光 = 吸收光 十 透过光。江西超微量分光光度计核酸检测
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