鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06X体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液(均需要无菌、预冷):10xPBS(可含10mg/L的酚红用于pH指示)或10x培养液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),双蒸水不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):将200ul生友鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100ul10xPBS或10x培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立。苏州鼠尾胶原直销价
胶原蛋白占人体蛋白质总量的三分之一,不论来源于哪一种动物或哪一种组织的胶原都有许多共同特性。胶原蛋白可分为20几个亚型,但为常见的为I、II、III型胶原蛋白,即间质胶原蛋白。其中I型为丰富且品质优良。划重点:任何动物的胶原都有许多共性,I型胶原蛋白为丰富且品质优良,鼠尾胶原蛋白是I型胶原蛋白。于是,动物中心就进行了有关“耗子尾汁”的发明:一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法并在说明书中给出了原因:“一般的生物体中提取的胶原蛋白多为混合型,之前多从牛皮、猪皮、牛腱中提取,但这类胶原蛋白不仅有油脂等其他杂质,苏州正规鼠尾胶原生产厂家将尾腱剪断置于平皿中,生理盐水浸泡。
鼠尾胶原蛋白I型,用那一种胶原酶可以溶解:1.将胶原加入到0.1M的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。在接种细胞前用无菌的水漂洗。
鼠尾胶原蛋白的用途是什么:将尾巴从动物身体切除后,会冷冻起来,并提取尾巴里的筋腱。然后,将筋腱切成小块,并在离心处理之前添加到由醋酸和水勾兑而成的混合物中。用这种方法,能将胶原蛋白从动物材料中分离出来。在食品加工领域,鼠尾胶原蛋白用于生产明胶并添加到布丁和棉花糖中。它还可以当作酸奶,冰淇淋,果酱和奶油芝士等食品的增稠剂使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感觉和质地。它还用于生产膳食保健品,据说能让手指甲和皮肤看起来更好。此外,还有基于胶原蛋白的保健品,可用于促进关节健康。鼠尾胶原醋酸溶解:在2-8度中放置过夜。
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿,培养一些在普通细胞培养器皿中不易贴壁的细胞。也可用于制备三维胶,模拟真实的生长环境,使细胞在三维环境中生长。1,在使用鼠胶原蛋白型包被的细胞培养皿中检查到PC-12细胞的贴壁和生长。1mg/ml浓度以上,pH左右时可形成具有一定强度的三维胶,检查到NIH-3T3细胞在三维胶内正常生长、PC-12细胞在三维胶表面正常生长。使用方法:1、细胞培养器皿的表面包被推荐浓度:1-5ug/cm0.012mg/ml。按以下表格体积加到相应的培养器皿中。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。建立利用自制的鼠尾胶原培养大鼠耳蜗边缘细胞的方法。苏州鼠尾胶原生产厂家
制备鼠尾胶原:重复步骤2、3,直至尾腱量够用。苏州鼠尾胶原直销价
使用方法:1、细胞培养器皿的表面包被:以包被浓度为2μg/cm2为例,用无菌0.006mol/L乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/mL。加到相应的培养器皿中,确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。开盖在超净台上过夜晾干,也可以在室温放置1小时后,用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。2、三维胶原凝胶的制备:A、无细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)将200μL本品加到置于冰浴的离心管中,加入690μL双蒸水,然后加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入100μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。苏州鼠尾胶原直销价
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