单克隆抗体:解决多克隆抗体特异性不高的理想方法是制备识别单一表位特异性的抗体。如果能获得只针对单一表位的浆细胞克隆,并使其在体外扩增分泌抗体,就有可能获得单一表位特异性的抗体。然而,浆细胞在体外的寿命较短,难以培养。为克服这一缺点,Kohler和Milstein将可产生特异性抗体但短寿的B细胞与不产生抗体但长寿的骨髓瘤细胞融合,获得了可以产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,从而建立了单克隆抗体制备技术。通过该技术融合形成的杂交瘤(hybridoma),上海Prestige Antibodies抗体基因,既具有骨髓瘤细胞大量扩增和永生的特性,上海Prestige Antibodies抗体基因,又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力,上海Prestige Antibodies抗体基因。抗体的保护作用并非完全,某些病原体可能会发展出逃逸机制,绕过抗体的防御。上海Prestige Antibodies抗体基因
多克隆单克隆:天然的抗原分子中常含有多种不同的抗原表位,以该抗原刺激机体的免疫系统可同时启动多种B细胞克隆,产生的抗体中会含有多种针对不同抗原表位的抗体,因此称之为多克隆抗体。多克隆抗体主要从动物免疫血清、恢复期患者血清或免疫接种人群的血清中获得。多克隆抗体的优势是:作用全方面,具有中和抗原、免疫调理、补体依赖的细胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且来源普遍、制备简单。其缺点是:特异性不高、易发生交叉反应,不易大量制备,因而限制了其应用的范围。合肥异种抗体多克隆抗体可以通过改变免疫原的免疫化策略来提高抗体的亲和力和特异性。
IgE是什么?与过敏有什么关系?IgE是如何参与过敏反应:IgE的尾巴则和效应细胞(肥大细胞、嗜碱性粒细胞)粘住。上述过程称为“致敏”。游离状态的IgE抗体半衰期是2-3天,如果长期不接触变应原,致敏状态可逐渐消失。但是,当此过敏原再次进入机体后,人体免疫系统就立即被认识它的IgE抓住,IgE的尾巴给肥大细胞报信,细胞释放组胺等炎性介质,使血管扩张,腺体分泌增加等,作用于组织部位,从而引发各种过敏症状。在各类过敏性疾病中,IgE与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的特异性受体结合,导致细胞信号启动,因此在过敏体质或超敏患者中,血清中总IgE水平明显高于健康人群。
按抗体产生的来源分为正常抗体(天然抗体),如血型ABO型中的抗A和抗B的抗体,和免疫抗体如抗微生物的抗体。按反应抗原的来源分为异种抗体,异嗜性抗体,同种抗体和自身抗体。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体IgM和不完全抗体IgG等。抗体在医疗实践中应用甚为普遍。如用于疾病的预防、诊断和调理方面都有一定的作用。临床上用丙种球蛋白预防病毒性肝炎、麻疹、风疹等,国际上用抗Rh免疫球蛋白预防因Rh血型不合引起的溶血症。诊断上如类风湿因子用于类风湿性关节炎,抗核抗体(ANA)、抗DNA抗体用于系统性红斑狼疮,抗精子抗体用于原发性不孕症的诊断等;调理上如中毒用抗毒调理以及免疫缺陷性疾病的调理等。单克隆抗体在恶性症调理中具有潜在的应用价值。
选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的小鼠骨髓瘤细胞中DNA的从头合成途径会被阻止;未融合的骨髓瘤细胞又因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用补救途径合成DNA;这样未融合小鼠骨髓瘤细胞的两个DNA合成途径都被阻止,骨髓瘤细胞DNA不能复制而死亡。 未融合的B淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从B淋巴细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,可以通过补救途径合成DNA,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此,杂交瘤细胞能在HAT培养基中存活和增殖。单克隆抗体可以识别和分离特定的细胞类型。北京自身抗体基因
多克隆抗体是一种通过小鼠或其他动物产生的抗体,可以与多个不同的抗原结合。上海Prestige Antibodies抗体基因
免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫部位,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。细胞融合采用二氧化碳气体处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。上海Prestige Antibodies抗体基因
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