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广东性能稳定超微量分光光度计探针检测 欢迎来电 上海宝予德科学仪器供应

信息介绍 / Information introduction

分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。
分光光度计的结构:
各种型号的分光光度计基本结构都相同,由如下五种部分组成:
1)光源(钨灯、卤钨灯,氢弧灯,氘灯、氙灯或激光光源);
2)单色器(滤光片、棱镜、光栅、全息栅);
3)样品吸收池;
4)检测系统(光电池,广东性能稳定超微量分光光度计探针检测、光电管、光电倍增管);
5)信号指示系统(检流计、微安表、数字电压表,广东性能稳定超微量分光光度计探针检测、示波器、微处理机显像管),广东性能稳定超微量分光光度计探针检测。

光源-单色器-样品吸收池-检测系统-信号指示系统。

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朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。广东性能稳定超微量分光光度计探针检测

超微量分光光度计比色法测定蛋白质浓度:
BCA法:这是一种较新的、更敏感的蛋白测试法。要分析的蛋白在碱性溶液里与Cu2+反应产生Cu+,后者与BCA形成螯合物,形成紫色化合物,吸收峰在562nm波长。此化合物与蛋白浓度的线性关系极强,反应后形成的化合物非常稳定。相对于Lowry法,操作简单,敏感度高。但是与Lowry法相似的是容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。
Bradford法:这种方法的原理是蛋白质与考马斯亮兰结合反应,产生的有色化合物吸收峰595nm。其比较大的特点是,敏感度好,是Lowry和BCA两种测试方法的2倍;操作更简单,速度更快;只需要一种反应试剂;化合物可以稳定1小时,方便结果;而且与一系列干扰Lowry,BCA反应的还原剂(如DTT,巯基乙醇)相容。但是对于去污剂依然是敏感的。**主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大,无可比性。
陕西操作简便超微量分光光度计探针检测Lowry法的原理是蛋白质与Cu2+反应,产生蓝色的反应物。

传统分光光度计:
样品体积要求大,绝大部分要50μL以上;
需使用比色皿,每次换样品时,比色杯需要清洗,工作繁重;
光程一般为10mm,样品需要稀释,测量浓度范围小;
灯源一般由氘灯(紫外)和钨灯(可见)组成,寿命短;
需要预热半个小时以上;
显示吸光度值,不显示浓度值;
仪器体积大,质量重;
超微量分光光度计;
所需样品体积小,*需1~2μL;
不需要比色皿,用移液枪直接将样品滴加到检测平台上;
具有多个光程(电机控制自动选择光程),样品无需稀释,测量范围可达到常规分光光度计的50倍;
氙气闪光灯为灯源,寿命长,性能稳定;
不需要预热,可随时检测;
显示吸光度值的同时,程序直接给出浓度值(核酸、蛋白和荧光染料)。

Micro Drop蛋白质检测功能:
Protein BCA检测类型:
BCA是一种通过比色来检测非纯蛋白的浓度的方法,它通常用于稀释的蛋白浓度检测,以及那些在紫外区域含有吸收光杂质的蛋白的浓度检测。BCA法需要在蛋白定量前构建一个标准曲线。
BCA法是检测Cu+1离子的方法,在碱性环境下,Cu+2离子会被蛋白还原为Cu+1离子。两个联喹啉二羧酸BCA分子和一个Cu+1离子会形成紫色的螯合物。在有蛋白存在的情况下,以750nm波长的吸光值为基线,Cu-BCA形成的螯合物在562nm处有比较大吸光值。
常规检测使用试剂/蛋白样品的体积比为20:1,检测浓度范围为0.20mg/ml到8.0mg/ml(BSA)。当使用基座检测时,推荐使用4μl样品和80μlBCA试剂。
微量检测使用试剂/样品的体积比为1:1,可以检测蛋白浓度范围从0.01mg/ml至0.20mg/ml。要准备足够的样品来做基座检测,建议使用10μl样品和10μlBCA试剂(使用PCR管)。 
按照试剂盒生产厂家的说明来准备标准品和构建标准曲线。确保在所有检测过程中,每个样品的处理时间及环境温度一致。
Micro Drop的基座模式可检测0.5-2μl的样本。

朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。当一束单色光(指路由一种颜色的光)通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过。
朗伯比尔定律:A = abc
其意义为:当一束单色光通过一均匀溶液时,溶液对单色光的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。
A =abc 中,吸光系数a,表征吸光物质的 灵敏度。a值越大,灵敏度越高。如果浓度的单位为物质的量浓度(单位为:mol/L),则吸光系数a可以写成ε ,ε称为摩尔吸光系数。
由上式可知,当溶液层厚度b和吸光系数a固定时,吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定比较大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源(单色光),进行吸光度A的测定,这是朗伯比尔定律用于定量分析的首要条件。
Bradford法的原理是蛋白质与考马斯亮兰结合反应。高重复性超微量分光光度计菌液检测

荧光分光光度计和紫外可见分光光度计是实验室常用的光学仪器。广东性能稳定超微量分光光度计探针检测

Micro Drop蛋白质检测功能:
Protein Lowry检测方式:
Lowry法是蛋白与硫酸铜在碱性环境下反应形成铜-蛋白复合物。Folin-Ciocalteu试剂可以有效的还原铜复合物,产生与蛋白量成比例的蓝色产物。检测该蓝色产物在650nm处的吸光值,并在405nm处做基线校正,计算得出蛋白的浓度。试验中使用的试剂可以从多个厂家购买。与其他比色法一样,Lowry法进行蛋白定量检测前也需要构建一个标准曲线。
推荐使用20μl的蛋白样品和100μl Lowry试剂来做反应。在Micro Drop上可以检测的样品浓度范围为0.20mg/ml到4mg/ml。
按照试剂盒生产厂家的说明来准备标准品和和构建标准曲线。确保在所有检测过程中,每个样品的处理时间及环境温度一致。可以从试剂盒生产厂家购买用于构建标准曲线的蛋白标准品(BSA)。
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