单克隆抗体技术在临床应用中为疾病的诊断、调理提供了新手段,作为调理用药物,单克隆抗体主要应用于瘤细胞、自身免疫疾病、部位移植排斥及病毒传染等领域。单克隆抗体也可用于瘤细胞的导向调理,将针对某一瘤细胞抗原的单克隆抗体与化疗或放疗药物连接,利用单克隆抗体的专一性识别结合特点,江苏Prestige Antibodies抗体基因,将药物携带至靶细胞并直接将其杀伤,江苏Prestige Antibodies抗体基因。由于单克隆抗体具有特异性强、纯度高、均一性好等优点,极大促进了单克隆抗体检测试剂盒的发展,在病原微生物、瘤细胞、免疫细胞及细胞因子的检测诊断中广泛应用。若将放射性标记物与单克隆抗体连接,注入患者体内后可进行放射免疫显像,协助瘤细胞的诊断,江苏Prestige Antibodies抗体基因。中和抗体是一种能够中和病毒入侵的抗体,对病毒传染具有重要意义。江苏Prestige Antibodies抗体基因
抗体可变区和恒定区:可变区 重链和轻链的V区分别称为VH和VL。VH和VL中各含有3个氨基酸组成和排列顺序高度可变的区域,称为高变区(hypervariable region,HVR)或互补决定区(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)变化程度更高。VH的3个高变区分别位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3个高变区分别位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3个CDR共同组成Ig的抗原结合部位(antigen-binding site),决定抗体的特异性,是抗体识别及结合抗原的部位。在V区中,CDR之外区域的氨基酸组成和排列顺序相对保守,称为骨架区(framework region,FR)。VH或VL各有四个骨架区,分别用FR1、FR2、FR3和FR4表示。江苏Prestige Antibodies抗体基因单克隆抗体是通过基因工程技术制备的,具有高度特异性和稳定性,被普遍应用于调理和诊断领域。
抗体特性和功能:IgD正常人血清lgD浓度很低,仪占血清Ig总量的0.2%。IgD可在个体发育的任何时间产生。5类lg中,IgD的铰链区很长,易被蛋白酶水解,故其半衰期很短(只3天)。lgD分为两型:血清型IgD的生物学功能尚不清楚;膜结合型IgD(mlgD)构成BCR,是B细胞分化发育成熟的标志,未成熟B细胞只表达mlgM,成熟B细胞可同时表达mlgM和mIgD,称为初始B细胞(naive B cell)。活化的B细胞或记忆性B细胞表面的mlgD会逐渐消失。IgE是正常人血清中含量很少的Ig,血清浓度极低,约为5×10-5mg/ml。
1975年,Kohler和Milstein建立了单克隆抗体(monoclonai antibody,mAb)技术,使规模化制备高特异性、均质性抗体成为可能。然而,鼠源性mAb在人体反复免疫后出现的人抗鼠抗体(human anti-mouseantibody,HAMA)很大程度上限制了mAb的临床应用。近年来,随着分子生物学的发展,人们已经可以通过抗体工程技术制备人一鼠嵌合抗体、人源化抗体或人源抗体。天然的抗原分子中常含有多种不同的抗原表位,以该抗原刺激机体的免疫系统可同时启动多种B细胞克隆,产生的抗体中会含有多种针对不同抗原表位的抗体,因此称之为多克隆抗体。抗体按其反应形式分为凝集素、沉降素、抗毒、溶解素、调理素、中和抗体、补体结合抗体等。
多克隆抗体免疫动物:抗体的效价鉴定 不管是用于诊断还是用于调理,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验(ELISA)等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。抗体的特异性鉴定 抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。抗体是一类能与抗原特异性结合的免疫球蛋白。江苏Prestige Antibodies抗体基因
抗体的结构多样性使得它们能够识别和结合各种形状和性质的分子。江苏Prestige Antibodies抗体基因
多克隆抗体主要从动物免疫血清、恢复期患者血清或免疫接种人群的血清中获得。多克隆抗体的优势是:作用全方面,具有中和抗原、免疫调理、补体依赖的细胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且来源普遍、制备简单。其缺点是:特异性不高、易发生交叉反应,不易大量制备,因而限制了其应用的范围。单克隆抗体解决多克隆抗体特异性不高的理想方法是制备识别单一表位特异性的抗体。如果能获得只针对单一表位的浆细胞克隆,并使其在体外扩增分泌抗体,就有可能获得单一表位特异性的抗体。然而,浆细胞在体外的寿命较短,难以培养。为克服这一缺点,Kohler和Milstein将可产生特异性抗体但短寿的B细胞与不产生抗体但长寿的骨髓瘤细胞融合,获得了可以产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,从而建立了单克隆抗体制备技术。江苏Prestige Antibodies抗体基因
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