一般酶标仪的测定波长在400～750nm或800nm之间，完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP)，底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD)，其在过氧化氢溶液的存在下，经HRP作用，分别氧化为2，2，海南双检测模式酶标仪智能化，—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5．0左右时，DAB在450nm波长处有比较大吸收，当pH值降为L 0时，海南双检测模式酶标仪智能化，比较大吸收波长移至492 nm，同时摩尔消光系数变大，显色加深，因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应，海南双检测模式酶标仪智能化。滤光片酶标仪也有优势，例如价格较为便宜，检测灵敏度高，带宽的可选择性。海南双检测模式酶标仪智能化

在双波长测定中，减少了测定干扰和电路干扰，因此测定结果比单波长测量明显好转。由于液体表面张力的不同，导致单波长测定时的误差较大。并且用不同的洗涤剂会影响到加入底物和终止液后的液面情况，用加入表面活性剂的洗涤液清洗后，形成的液面更凹，对单波长检测的影响更大，并且与表面活性剂的浓度成正比。而且中性蒸馏水洗涤后，单、双波长检测的结果基本一致。利用双波长检测，不会影响检测灵敏度。建议在进行酶联免疫检测时，酶标仪比色应该优先双波长。这样可以提高临界值处标本的分析正确度，减少实验误差。

在用酶联免疫法测定抗原或抗体时，不论是定量试验还是定性试验都要求使用酶标仪进行测定。一般的酶标仪在测定中均有单波长和双波长的模式，并且采用的都是垂直光路。但在日常工作中有时会不太重视单波长和双波长的选择，对使用单、双波长给测定结果带来的较大差异也不很了解，***咱们就来了解一下这两个测量方法。酶标仪与分光光度计、自动生化分析仪等的吸光度测定有所不同，一般分光光度计是水平光路，而酶标仪则是垂直光路，但测定原理相同，都是使用朗伯-比耳定律，测定的都是样本的吸光度。垂直光的特点是标本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小，不足之处是受被测样本液面是否水平、酶标板透光性、孔底是否平整等的影响较大。K3 Plus酶标仪扩展内存可以储存多达500个测定方法。江苏全自动酶标仪智能化

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