Micro Drop蛋白质检测功能:
Protein Lowry检测方式:
Lowry法是蛋白与硫酸铜在碱性环境下反应形成铜-蛋白复合物。Folin-Ciocalteu试剂可以有效的还原铜复合物,产生与蛋白量成比例的蓝色产物。检测该蓝色产物在650nm处的吸光值,并在405nm处做基线校正,计算得出蛋白的浓度。试验中使用的试剂可以从多个厂家购买。与其他比色法一样,Lowry法进行蛋白定量检测前也需要构建一个标准曲线。
推荐使用20μl的蛋白样品和100μl Lowry试剂来做反应。在Micro Drop上可以检测的样品浓度范围为0.20mg/ml到4mg/ml。
按照试剂盒生产厂家的说明来准备标准品和和构建标准曲线,江西操作简便超微量分光光度计核酸检测,江西操作简便超微量分光光度计核酸检测。确保在所有检测过程中,江西操作简便超微量分光光度计核酸检测,每个样品的处理时间及环境温度一致。可以从试剂盒生产厂家购买用于构建标准曲线的蛋白标准品(BSA)。
A260/A280:是核酸纯度的指示值。江西操作简便超微量分光光度计核酸检测
分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。
分光光度计的结构:
各种型号的分光光度计基本结构都相同,由如下五种部分组成:
1)光源(钨灯、卤钨灯,氢弧灯,氘灯、氙灯或激光光源);
2)单色器(滤光片、棱镜、光栅、全息栅);
3)样品吸收池;
4)检测系统(光电池、光电管、光电倍增管);
5)信号指示系统(检流计、微安表、数字电压表、示波器、微处理机显像管)。
光源-单色器-样品吸收池-检测系统-信号指示系统。
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江西超微量分光光度计单光束分光光度计是由一束经过单色器的光,轮流通过参比溶液和样品溶液,以进行光强度测量。
测试在紫外区有吸收的样品时用石英比色皿,测试只在可见光区有吸收的样品时使用玻璃比色皿。石英比色皿在可见和紫外光区没有吸收,而玻璃比色皿在紫外区有吸收,所以不能用于紫外光区。对于一般的非光学专业人员,用眼睛是不能分开的两种比色皿的。但是两者硬度差别很大很大。石英比色皿比玻璃比色皿硬度大(***值)几十倍,如果把两个对磨,石英比色皿将很少被磨损,而玻璃比色皿磨损非常大。由于石英比色皿的透光范围从0.12-4.5微米,***的谱段范围内没有任何吸收峰。而玻璃比色皿只有0.4-4微米,且有许多离子吸收峰。所以,石英比色皿要比玻璃比色皿优越的多,化验数据更准确、更可靠。
超微量分光光度计注意事项:
1、Micro Drop超微量分光光度计应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2、使用Micro Drop超微量分光光度计前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,甲醛检测仪以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
核酸的较高吸收峰的吸收波长260nm。
Micro Drop快速启动操作:
1. 双击软件图标,并在功能键中选择感兴趣的软件应用。
2. 输入样品编号。
3. 用干净的无尘纸擦干净上下基座,用合适的液体建立空白对照,空白对照液体是溶解目标分子的液体。
空白对照液体的pH值和离子浓度应和检测样品一样。
基座模式:取1-2μl空白对照加到基座上,放下检测臂,勾选基线校正,点击空白检测键。
比色皿模式:插入比色皿时注意仪器上箭头指示方向。光束(2mm宽)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,请按照比色皿生产厂家的建议加入液体。
蛋白质在280nm波长处有较大吸光值。安徽高灵敏度超微量分光光度计探针检测A320nm 或A340nm——是基线校准波长,为检测溶液样品的浊度和其他干扰因子。江西操作简便超微量分光光度计核酸检测
朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法定量分析依据的基本原理。当一束单色光(指路由一种颜色的光)通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过。
朗伯比尔定律:A = abc
其意义为:当一束单色光通过一均匀溶液时,溶液对单色光的吸光度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。
A =abc 中,吸光系数a,表征吸光物质的 灵敏度。a值越大,灵敏度越高。如果浓度的单位为物质的量浓度(单位为:mol/L),则吸光系数a可以写成ε ,ε称为摩尔吸光系数。
由上式可知,当溶液层厚度b和吸光系数a固定时,吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定比较大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源(单色光),进行吸光度A的测定,这是朗伯比尔定律用于定量分析的首要条件。
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