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广东检测快速酶标仪酶联免疫 上海宝予德科学仪器供应

信息介绍 / Information introduction

酶标仪在用单波长测定吸光度时,除受到测定干扰(样本的浊度、干扰色等)和电路干扰(包括噪音、漂移、电压等)等因素外,受液体表面张力的影响也很大。在检测过程中,由于液体表面张力的作用,液体的表面不是一个平面,而是形成一个凹面,从侧面看似凹透镜,广东检测快速酶标仪酶联免疫,这样不可避免会影响光路的正常通过。由于凹液面的影响,广东检测快速酶标仪酶联免疫,光线在通过液体时,除正常被液体吸收一部分外,尚有部分被折射和反射(如光线通过凹透镜那样),影响吸光度的检测。而酶标仪使用的又是通过光导纤维传播的点光源,如果每次能在同一部位检测,吸光度的重复性将得到保证,但由于机械运动等造成的误差,不可能保证每孔都在相同部位被检测,广东检测快速酶标仪酶联免疫,因此造成了孔与孔之间有一定的差异。在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收光能量。广东检测快速酶标仪酶联免疫

酶标仪有单波长和双波长检测功能。有时使用者不知在什么情况下使用单或双波长检测。所谓的“单波长”就是使用一种对显色具比较大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定;而“双波长”则除了用对显色具比较大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定外,同时用对特异显色不敏感的波长如630 nm进行测定,酶标仪打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下得到的吸光度是非特异的,来自于板孔上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。因此,在ELISA比色测定中,比较好使用双波长,且不必设空白孔。重庆性能稳定酶标仪智能化K3 Plus酶标仪可以用于研究或由专业人员在常规化验室内使用。

一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有比较大吸收,当pH值降为L 0时,比较大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。

酶标仪测量原理:光学测量。
K3 Plus酶标仪采用的是上海宝予德科学仪器有限公司传统的垂直测光理念,即光束穿过整个样品。在垂直测光中,吸光度与孔板中吸光物质的数量成比例。
垂直光路测量的优点:
1. 对非吸光液体物质的不正确的移液不影响测量的吸光值。
2. 反应过程中非吸光液体物质的挥发不影响测量的吸光值。
3. 溶液中存在某程度的非均一性,例如浊度测量中的分层现象,不会对测量结果造成影响。
光学系统包括以下部件:石英卤素灯、斩光轮、孔径透镜与聚光透镜、半透明反射镜、孔径、干涉滤光片(滤光片轮)、光纤束、聚焦透镜、上透镜与检测器。
化学发光是来自生物化学反应中的自发光,可分为辉光型和闪光型两种类型。

双波长检测的原理:在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。一般来说在ELISA操作中出现的黄颜色溶液,在450nm波长下会有比较大的吸收值。但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。在ELISA酶标仪中一般采用比较长作为参照波长,以消除非特异性吸收以及底部的指纹等其他干扰。所以在做现代ELISA实验时,比较好能选择双波长进行读数,可比较大限度的消除指纹、杂质及不透光的物质对酶标仪读数带来的误差,以保证实验数据的准确性。滤光片是酶标仪中重要的光学元件。福建性能稳定酶标仪

酶标仪的测定原理使用朗伯-比耳定律。广东检测快速酶标仪酶联免疫

滤光片是酶标仪中重要的光学元件,它的作用是根据不同的波长选择性地透过或反射光线,从而实现对样品信号的分离和增强。滤光片可以分为干涉滤光片和吸收滤光片两种,前者是利用多层薄膜之间的干涉效应来实现波长选择,后者是利用染料或金属等材料对特定波长的吸收来实现波长选择。干涉滤光片具有透过率高、带宽窄、温度稳定性好等优点,是目前酶标仪中常用的滤光片类型。
酶标仪中常用的滤光片有三种:激发滤光片、发射滤光片和参考滤光片。激发滤光片位于光源和样品之间,用于选择合适的激发波长来激发样品发出荧光或化学发光。发射滤光片位于样品和探测器之间,用于选择合适的发射波长来检测样品发出的荧光或化学发光。参考滤光片位于参考探测器前面,用于消除环境因素对检测结果的影响,提高检测精度。
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