膜分离技术发明的目的在于提供一种水溶性壳寡糖提纯和浓缩的方法，过程无相变，能耗低，易于工业化生产，提高壳寡糖的得率，且得到的壳寡糖高纯度、分子量分布窄，适用于制备符合医药级的壳寡糖产品，提高壳寡糖产品附加值。为实现上述目的，本发明提供的一种水溶性壳寡糖提纯和浓缩的方法，具有以下步骤：(1)将壳寡糖降解液通过陶瓷膜进行预处理，去除降解液中的不溶杂质(包括壳寡糖和其它不溶杂质)，得到陶瓷膜透过液；(2)采用超滤膜将陶瓷膜透过液进一步提纯，去除大分子蛋白质和大分子多糖，得到超滤透过液；(3)采用纳滤膜对超滤透过液进行浓缩-加水的四级分离浓缩，去除无机盐和单糖，得到壳寡糖纳滤浓缩液；(4)对浓缩的壳寡糖浓缩液进行喷雾干燥，山东氨基寡糖素25%，山东氨基寡糖素25%，得到高纯度的壳寡糖粉末；所述步骤(3)中，采用纳滤膜进行的四级分离和浓缩的每级的浓缩比例为2-5倍，山东氨基寡糖素25%。 壳寡糖不仅能促进植物生长，还可以抵御并提高植物的生物胁迫性。山东氨基寡糖素25%

    壳寡糖是壳聚糖降解后聚合度在2～20范围内的低聚糖。与壳聚糖相比，它具有良好的水溶性及强大的生物学活性，是一种新型植物生长调节剂。壳寡糖可作为免疫激H因子，诱导植物先天性免疫，合成抗病菌物质，激发植物基因防御，增强植物抗病能力。研究表明，在植物遭遇逆境时低分子量的壳聚糖能发挥积极作用，提高净光合作用速率，抵抗渗透物质的合成，提高植物体抗氧化酶活性，增强去除自由基的能力，保护膜系统，增强植物体的自身抗性，促进植物生长。受限于壳寡糖不易制备，壳寡糖对作物的影响研究较少。目前大多数研究工作都没有说明试验中所采用的壳聚糖或寡糖分子量。2007年，本课题组筛选出高产壳聚糖酶菌株，并随后对该菌株的壳聚糖酶基因通过定点突变进行改造，克隆至Pichiapastoris，筛选的重组子酶活力高达1480U/mL。近年来，围绕壳聚糖的酶解工艺做了大量研究工作，可以制备分子量2000～3000的壳寡糖。因此，本文以水稻幼苗为研究对象，通过喷施不同浓度的壳寡糖溶液，研究壳寡糖对水稻幼苗生长以及抗逆生理指标的影响，以期为研究壳寡糖的功能以及稳定水稻产量提供基础。 山东农大氨基寡糖素诱抗活性与壳寡糖的聚合度和脱乙醜度有关，聚合度越低，脱己酷度越高。

    植物细胞识别微生物细胞壁上的片段物质是植物在诱导后反应的首步，这种片段物质被称为激发子，此过程也称为即激发子受体识别。激发子受体的相互识别的过程是防御过程第一步，随后发生细胞构型的变化、蛋白质磷酸化和抗性相关酶活性的增强，及植物体信号分子间的转导。壳寡糖不能直接被植物识别，其结合在质膜上并激发多种防御反应；并诱导植物体产生信号分子，如水杨酸、茉莉酸、引噪乙酸等，这些信号分子既可以相互协同，起到强化信号分子间转导的作用；又可以相互拮抗。张付云等经壳寡糖处理后，果蔬细胞内的第二信使的浓度发生变化，这对植保素的合成和积累有一定的影响作用。壳寡糖是植物识别病原菌入侵的非特异性信号，能够激发植物体产生具有抗病性的免疫蛋白，其不仅可直接抑制病原菌的生长（黄丽萍等），还可诱导植物产生强烈的免疫诱导活性。赵小明等的研究发现壳寡糖可以与烟c和草莓细胞结合，这说明壳寡糖在草巷和烟c细胞壁上有专一的但不确定性质的结合位点。张洪艳等发现用不同浓度的壳寡糖溶液处理烟c细胞均可以诱导的产生。杜星光等发现用壳寡糖处理烟c可在处理后个小时均明显增加赤霉酸和茉莉酸含量。

       水溶性壳寡糖提纯和浓缩的方法，具有以下步骤：(1)将200l壳寡糖降解液(壳聚糖含量约2.5％)通过孔径为200nm的板式碳化硅陶瓷膜进行过滤预处理，去除未降解壳聚糖和其它不溶物杂质，得到192.0l透过液；(2)采用截留分子量为5000da的聚醚砜卷式超滤膜进一步对陶瓷膜透过液提纯，去除大分子多糖和其它杂质，得到180.0l超滤透过液；(3)采用截留分子量为500da聚酰胺卷式纳滤膜对超滤透过液进行一级和两级浓缩-加水分离浓缩(浓缩-加水-浓缩)，采用截留分子量为200da聚醚砜卷式纳滤膜对超滤透过液进行三级和四级浓缩-加水分离浓缩(加水-浓缩-加水-浓缩)，浓缩比例为4倍，加水比例为3倍，去除无机盐和单糖，结果得到45.0l壳寡糖纳滤浓缩液；(4)结果浓缩的壳寡糖浓缩液进行喷雾干燥，得到3.86kg高纯度的壳寡糖粉末，得率为77.2％。壳寡糖可以增强植物体内渗透调节能力，光合作用和抗氧化能力等来提高植物抗性。

    植物功能调节剂氨基寡糖素(壳寡糖)可作为植物功能调节剂,具有活化植物细胞，促进植物生长，调节植物抗性基团的关闭与开放,激发植物防御反应,启动抗病基因表达等作用。日本已将氨基寡糖素制成植物生长调节剂,用于提高某些农作物产量。张文清等研究了氨基寡糖素对黄瓜生长的促进作用，结果表明，氨基寡糖素处理过的黄瓜植物不但对霜霉病的抗性增强，而且对果实采收期可提前列~5d，产量明显提高。壳寡糖可有效的诱导植物产生防御反应，激发植物的系统性获得免疫抗性。 壳寡糖具有壳聚糖所没有的较高溶解度，全溶于水，容易被生物体吸收利用等诸多独特的功能，为壳聚糖的14倍。山东氨基寡糖素治花叶病吗

壳寡糖加工时需搅拌，本身较为粘稠，容易导致附着在设备内壁上的壳寡糖无法充分搅拌，影响搅拌效果。山东氨基寡糖素25%

    水稻是世界上重要的农作物之一，它对寒冷的胁迫非常敏感，尤其是在幼苗阶段。不可预测的低温胁迫会导致水稻产量明显下降（5-10％），并对农业经济产生不利影响。因此，提高水稻耐寒能力是提高作物产量的关键。壳寡糖是一种环境友好的免疫诱抗剂，已被广泛应用于植物免疫系统中。但壳寡糖诱导水稻抗寒的机制尚不完全清楚，本论文旨在探究壳寡糖提高水稻幼苗抗寒性的机制，以期为壳寡糖作为植物免疫诱抗剂应用于农业中提供科学依据。首先，在本研究中，探究了两种不同脱乙酰度的壳寡糖在不同处理方式下的抗寒效果。结果表明，两种壳寡糖在根系处理时效果好。低温处理后，施用脱乙酰度为98％的壳寡糖时，100ｍｇ/Ｌ壳寡糖根系处理株抗寒效果好，其单株鲜重与对照株相比增加了％，相对电导率降低了；施用脱乙酰度为86％的壳寡糖时，150ｍｇ/Ｌ壳寡糖根系处理株抗寒效果好，其单株鲜重相较于对照株増加了，相对电导率下降了38％。综合实验结果和经济效益表明，150mg/L脱乙酰度为86％的壳寡糖在根系处理时效果更好。其次，进一步深入探讨壳寡糖对水稻幼苗抗寒性的影响。比较了壳寡糖处理前后水稻渗透压调节物质、光合作用和根系活力的相关指标。 山东氨基寡糖素25%

青岛颂田生物技术有限公司正式组建于2007-11-19，将通过提供以壳寡糖，海藻精，鱼蛋白，褐藻寡糖等服务于于一体的组合服务。是具有一定实力的农业企业之一，主要提供壳寡糖，海藻精，鱼蛋白，褐藻寡糖等领域内的产品或服务。随着我们的业务不断扩展，从壳寡糖，海藻精，鱼蛋白，褐藻寡糖等到众多其他领域，已经逐步成长为一个独特，且具有活力与创新的企业。青岛颂田生物技术有限公司业务范围涉及目前产品服务分为四大类，上百种种产品及技术服务： ①以海洋生物酶解技术输出和特种肥料产品开发为重点的技术服务项目； ②以壳寡糖、海藻提取物和鱼蛋白等海洋原料为重点的原材料供应； ③以海洋生物肥料、生物制剂产品为重点的作物营养综合解决方案； ④以动物保健添加剂、食品保健添加剂为重点的酶解提取物。等多个环节，在国内农业行业拥有综合优势。在壳寡糖，海藻精，鱼蛋白，褐藻寡糖等领域完成了众多可靠项目。

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