制作牛肉膏蛋白胨固体培养基：（1）方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。（2）倒平板操作的步骤：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。②右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约10～20mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，中国台湾实验室培养基制备仪。④等待平板冷却凝固，大约需5～10min。然后，中国台湾实验室培养基制备仪，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。倒平板操作的讨论1.培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板，中国台湾实验室培养基制备仪。你用什么办法来估计培养基的温度？提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。半固体培养基，指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。中国台湾实验室培养基制备仪

微生物发酵培养基配制注意事项：①养分浓度和配比合适：微生物只有在培养基中养分浓度合适的情况下才能生长良好是合适的。当养分浓度过低时，不能满足微生物正常生长的需要。②微生物培养基pH条件控制：培养基的pH必须控制在一定范围内，以满足不同种类微生物的生长繁殖或产生代谢物。各种微生物生长繁殖或代谢产物产生的较佳pH条件不同。通常细菌和放线菌适合在7~7.5pH范围内生长，酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范围内生长。③微生物培养基原料来源选择：培养基配制时，应尽可能使用低廉易得的原料作为培养基成分。尤其在发酵行业，培养基用量大，使用成本较低原料实现产品附加价值。例如在微生物单细胞蛋白的工业化生产过程中，制糖业含蔗糖废液、乳业含乳糖废液、大豆废液工业和黑色废物、造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸盐纸浆等经常被作为培养基原料使用。④成品培养基灭菌处理、为了获得微生物的纯培养物，必须避免被细菌污染，所以对使用的设备和工作场所进行消毒和消毒。对于微生物培养基要进行严格的灭菌处理。中国台湾实验室培养基制备仪选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。

固体培养基的制作步骤：1、首先我们要准备好一个装有1000ml的烧杯，然后在准备好的杯中在放入500ml的蒸馏水，在将牛肉膏和蛋白胨、氯化钠这些都溶解在水中。2、其次我们在调节PH值，调节时需要百分之10的氢氧化钠溶液，将PH值调到7.2，在此也要定容到1000ml，较后在将这些液体都分别放入10个锥形瓶内，每一瓶都装100ml。3、然后我们再把剪碎的琼脂放进五个锥形瓶里，在给每个锥形瓶中放入2.4克，然后在把这十个锥形瓶瓶口都弄上棉花塞，瓶子也要弄上报纸。4、较后我们就可以将刚才所包扎好的一些锥形瓶放入灭菌锅里，灭菌时一定要记得灭菌十分钟，十分钟到了之后，在将锥形瓶拿出来，冷却之后就成了固体培养基了。注意事项：倒入时一定要注意容易。灭菌时间十分钟，要看好时间。注意事项：倒入时一定要注意容易。灭菌时间十分钟，要看好时间。

固体斜面培养基配制：培养基各成份的混合和溶化：培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。较好使用不锈钢莴加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化，迄至煮沸。如为琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，较后必须加以补足。培养基pH的初步调正：因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，培养基各成分完全溶解后，应进行PH的初步调正。组合培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。

培养基的性能测试：1.外观控制：制备好的培养基应有相应的颜色，一般的培养基应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化，是否蒸发/脱水。2.污染控制：从每批制备好的培养基中选取部分进行污染测试(无菌试验)，确定无微生物生长方可使用。3.性能测试：(1)测试菌株选择：测试菌株是具有其表示种的稳定特性并能有效证明实验室特定培养基较佳性能的一套菌株。(3)半定量测试方法（改进的划线法接种法）。(4)定性测试方法（平板接种观察法）。用接种环取测试菌培养物，在测试培养基表面划平行直线。培养基一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。中国台湾实验室培养基制备仪

为防止冷凝水过多，也可将培养基冷却至45~50°C再倒平板。中国台湾实验室培养基制备仪

培养基的类别按照培养基的成分来分：培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是己知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏培养基等。(2)天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。中国台湾实验室培养基制备仪

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