黄曲霉m1检测试剂盒酶联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

1编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

2加样反应：加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应30分钟。

3洗涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350µl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，***一次拍干（用吸水纸拍干，拍干后未被***的气泡可用干净的***头刺破）。

4显色：每孔加入底物液A50µl，再加底物液B50µl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。

5终止：每孔加入终止液50µl，轻轻振荡混匀，终止反应。

6测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。

黄曲霉（Ａｆｌａｔｏｘｉｎ，ＡＦＴ）是一种具有强毒性和高致*性的天然污染物，它易污染玉米、大米、花生等农作物及其加工制成的食品、饲料，给人类以及动物的健康带来巨大威胁。黄曲霉污染的控制急需一种效率高、特异性强以及对词料和环境没有污染的检测技术，能够对受污染的样本进行快速检测，完成样本的快速筛查。黄曲霉b1快速检测卡采用免疫层析技术原理，利用抗原-抗体之间特异性结合的反应机制研制而成，可以快速准确检测各种谷物、饲料样本中黄曲霉素的残留，从而实现污染样本的快速筛查。

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