间接ELISA是实验室**常用的抗体检测方法之一,间接ELISA应用于各种病毒的检测,其原理是通过利用酶标二抗去辨识一抗来测定抗原量。各类ELISA方法均避免了病毒分离试验的危险性,也避免如PCR试验等无菌环境的限约。前期研究中有对口蹄疫病毒的检测和疫苗的研制的相关实验。有人利用原核表达后纯化建立了间接ELISA方法,为O型口蹄疫诊断试剂及基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。将O型口蹄疫病毒VP1基因在表达载体pET-41b中表达,**终建立了O型口蹄疫病毒的检测方法。
微量振荡:对微孔内的混合溶液进行充分混匀。将已用封口贴封闭的微孔板平稳牢固的放置于微量振荡器的载物平台上,以中等档位的力度震荡30s。手工混匀:单手握微孔板架长边两侧,在实验操作台上向左右轻轻平行摇晃60s,使混合液体均匀。将已密封的微孔板放置于室温或恒温箱37℃中温育反应。温育:在温育前将封口贴紧覆盖在微孔板上,确保无缝隙,将密封好的微孔板放置在37℃的恒温箱内,为了能够使试剂得到充分的反应,温育的温度非常重要。
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