黄曲霉素M1检测试剂盒酶联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

1编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

2加样反应：加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应30分钟。

3洗涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350ul工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，***一次拍干（用吸水纸拍干，拍干后未被***的气泡可用干净的***头刺破）。

4显色：每孔加入底物液A50µl，再加底物液B50µl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。

5终止：每孔加入终止液50µl，轻轻振荡混匀，终止反应。

6测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。

黄曲霉***（AFT）主要是由黄曲霉、寄生曲霉等霉菌产生的一类化学结构类似的毒性代谢产物，它们***存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别容易污染花生、玉米、稻米等粮食，是霉菌***中毒性比较大的一类霉菌***。目前，国内外应用较为***、检测准确性较高的黄曲霉***检测方法主要有液相色谱-质谱联用法、液相色谱法、酶联免疫吸附筛查法和薄层色谱法，同时还有胶体金免疫层析法等快检方法。其中以酶联免疫吸附筛查法和胶体金免疫层析法使用**为普遍！

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