黄曲霉m1检测试剂盒酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
1编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
2加样反应:加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。
3洗涤:小心揭开盖板膜,甩去孔内液体,每孔加350µl工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,***一次拍干(用吸水纸拍干,拍干后未被***的气泡可用干净的***头刺破)。
4显色:每孔加入底物液A50µl,再加底物液B50µl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。
5终止:每孔加入终止液50µl,轻轻振荡混匀,终止反应。
6测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。
食用含有大量黄曲霉***的食品则可能诱发病变,因此,黄曲霉***严重危害畜产品安全,是行业重点监控的风险因素之一。考虑到黄曲霉***的强毒性和致*性,应该尽可能减少黄曲霉***的摄入。但是,由于目前尚无法做到完全去除黄曲霉***,只能将其控制在一个比较安全的水平,将对人和动物的危害可能降至比较低。加强对易污染黄曲霉的谷物等样本的检测也是目前控制和预防黄曲霉污染的一个必要技术手段,检测黄曲霉的方法很多,其中酶联免疫法和胶体金法**为普遍,应用**为***!
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