黄曲霉素M1检测试剂盒酶联免疫试验步骤

将所需试剂从4℃冷藏环境中取出，置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解，每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架，将不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。

1编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

2加样反应：加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加酶标记物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗体工作液，用盖板膜封板，轻轻振荡5秒混匀，25℃反应30分钟。

3洗涤：小心揭开盖板膜，甩去孔内液体，每孔加350ul工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，***一次拍干（用吸水纸拍干，拍干后未被***的气泡可用干净的***头刺破）。

4显色：每孔加入底物液A50µl，再加底物液B50µl，轻轻振荡5秒混匀，25℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。

5终止：每孔加入终止液50µl，轻轻振荡混匀，终止反应。

6测吸光值：用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值（建议用双波长450/630nm）。测定应在终止反应后10分钟内完成。

原理及用途

黄曲霉b1检测卡应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成，用于检测谷物、饲料等样本中的黄曲霉***B1（AflatoxinB1，AFB1）。样本溶液滴入检测卡的加样孔后，样本溶液中的黄曲霉***B1与金标抗体相结合，从而阻止金标抗体与纤维素膜上黄曲霉***B1偶联物结合。当样本溶液中的黄曲霉***B1含量大于检测限时检测线不显色，结果为阳性；当样本溶液中黄曲霉***B1含量小于检测限时检测线显紫红色，结果为阴性。

技术指标

试剂卡灵敏度：2ppb（ng/ml）对样本的**终检测限须以试剂卡灵敏度乘以样本处理的稀释比例。

样本检测下限：

谷物、饲料、粮油……………20ppb

粮油……………………………10ppb

谷物、饲料（须吹干）………5ppb

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