金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)也称“金葡菌”,隶属于葡萄球菌属,是革兰氏阳性菌表示,为一种常见的食源性致病微生物。该菌较适宜生长温度为37℃,pH为7.4,耐高盐,可在盐浓度接近10%的环境中生长。金黄色葡萄球菌常寄生于人和动物的皮肤、鼻腔、咽喉、肠胃、痈、化脓疮口中,空气、污水等环境中也无处不在。我国国家卫生和计划生育委员会于2013年发布《食品安全国家标准食品中致病菌限量》(GB29921-2013),在国标中制定了金黄色葡萄球菌的限量标准:规定熟肉制品、熟制水产品、熟制粮食制品等8大类食品中,北京芽胞杆菌,北京芽胞杆菌,同批次采集5份样品,每份样品中的金黄色葡萄球菌浓度均不得超出100CFU/g,北京芽胞杆菌,只允许其中1份样品在100~1000CFU/g之间。用分子生物学方法在大肠杆菌得出的结论可用于其它生物的研究。北京芽胞杆菌
金黄色葡萄球菌为革兰阳性球菌,呈葡萄串状排列,无芽孢,无鞭毛,不能运动。适宜生长温度为35℃~37℃,但在0℃~47℃都可以生长。菌体不耐热,60℃的温度下,30分钟即可被杀死,但在冷藏环境中不易死亡。目前已经确认的至少有A、B、C1、C2、C3、D、E和F这8个型。A型肠有害元素引起的食物中毒较多,B型次之,C型较少。该有害元素的抗热力很强,煮沸1~1.5小时仍保持其毒力,也不受胰蛋白酶影响。120℃的温度下,20分钟还不能完全破坏。其抗原成分是耐热性蛋白质和多糖。因此,当其污染食品以后,用普通的烹调方法不能避免中毒。金黄色葡萄球菌的传染源一般来自有患化脓性炎症病人或带菌者。适宜该菌繁殖并产生有害元素的食品,由于各国气候条件和饮食习惯不同而有差异。我国常引起中毒的食品除乳及乳制品外,还有腌制的肉、鸡、蛋等食品以及含有淀粉的食品。由牛乳引起的食物中毒比较多,虽然牛乳在食用前一般经过煮沸,但是有害元素不能被破坏,如煮沸前污染严重并已经产生有害元素,仍可引起食物中毒。北京化工大学黄杆菌菌株铜绿假单胞菌在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素。
对铜绿假单胞杆菌的复苏,要先准备一个茶缸或1000毫升的烧坏,内装2/3杯37摄氏度的温水。从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。打开冻存管,将细胞悬液吸到离心管中。1000rpm离心10分钟,弃去上清液。沉淀加10毫升培养液,吹打均匀,再离心10分钟,弃上清液。加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中,37摄氏度培养,第二天观察生长情况。器材通常为液氮罐、冻存管(塑料螺口冻存管或安瓿瓶)、离心管、吸管、离心机等。试剂通常为0.25%胰酶、培养基、含保护剂的培养基(即冻存液)。冻存液配制是培养基加入甘油或DSMO,使其终浓度达5—20%。保护剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4摄氏度下保存。
铜绿假单胞杆菌与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;检测灵敏度可达10~100拷贝;该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。PCR反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法与热启动法相结合,更能有效地减少PCR过程中的非特异性反应,增强PCR扩增的特异性,能得到良好的PCR结果。因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。根据模板DNA的量以及扩增片段的大小,设定25~30个循环。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,则会出现Smear。枯草芽孢杆菌可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。
金葡菌普遍存在于自然环境中,如空气、土壤,是一种常见的需氧微生物。一方面,金黄色葡萄球菌可能导致人体体内传染致病菌,导致人患上一些传染性疾病,比如中耳炎、人体部位化脓等,还有可能造成皮肤上长出疖子;另一方面,金黄色葡萄球菌还可能引起人体内产生有害元素,有害元素多到一定的量,可能引发食物中毒。人和动物是主要的病菌携带者,大约50%以上健康个体的鼻腔、咽喉、头发和表皮中都带有这种菌。国际公认产生葡萄球菌肠有害元素的菌量浓度在100000个/克以上。金葡菌肠有害元素中毒可使人产生剧烈的恶心、呕吐,同时伴有上腹部绞痛、腹泻。严重者可导致虚脱、肠痉挛和严重失水。大肠杆菌的生产量逐年递增,可见其收益价值。海南德克斯酵母菌株
动物的致泻性大肠杆菌已被明确的特征主要是类似于ETEC的菌株。北京芽胞杆菌
在畜牧养殖业方面,枯草芽孢杆菌具有市场潜力,枯草芽孢杆菌能够增强畜禽免疫机能和抗氧化性能,提高畜禽的生产性能,但是由于其价格较贵,目前还主要应用于仔猪配合饲料等高附加值饲料产品。未来的研究重点应该放在进一步优化生产工艺,降低枯草芽孢杆菌类产品的成本,将其推广到畜禽配合饲料中;以及将枯草芽孢杆菌与其他功能性饲料添加剂(如啤酒酵母菌、菊糖和丝兰提取物等)进行合理搭配,充分发挥其增强畜禽免疫功能和抗氧化性能,提高畜禽生产性能的功效。在植物保护方面,枯草芽孢杆菌制剂可以与化学农药复配,实现优势互补、用量减少、防效增强的目的。北京芽胞杆菌
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