VNT试验需要涉及到细胞培养、病毒培养或者试验兔等,需要配置**设备处理猪瘟病毒的实验室和具有相关工作经验的技术人员等。不但工作成本高、费时费力,而且目前还未能实现高通量和自动化检测,不适用大量临床样品的处理与分析。为了克服VNT方法的缺点,Tetsuo等利用具有小报告标签的重组猪瘟病毒开发了高通量VNT荧光素酶系统作为替代方法。该系统可以方便、快速地监测CSFV的生长状态,使其快速、简便的利用光度计测定VNT滴度,可作为替代传统VNT方法的有力工具,实现高通量抗体检测。
猪瘟病毒VNT试验是将已知浓度的猪瘟病毒与不同稀释度的血清混合,再接种易感细胞(如ST细胞、PK细胞等)进行培养,然后进行荧光抗体检查。根据抗体标记物的不同,猪瘟病毒的中和试验可分为荧光抗体中和试验(Fluorescentantibodyneutralizationtest,FAVN)和过氧化物酶联中和试验(Neutralizationperoxidase⁃linkedassay,NPLA)。或将病毒与血清的混合物接种健康易感兔,观察兔体温变化以此确定血清的终点滴度。VNT方法准确性高,是猪瘟病毒抗体检测方法敏感性和特异性评价的金标准。它可以用于非免疫猪的猪瘟临床病例确诊、流行病学调查和免疫猪疫苗免疫效果评价等。
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