使用肺ai经2d培养的a549细胞系替换步骤2中的肺aizhong刘类***，并以正常胚肺成纤维细胞系mrc-5作为阴性对照，放入培养箱中与培养24小时后，使用(将新城疫病毒ndv溶瘤病毒作为待测溶瘤病毒，将腺病毒prostatak溶瘤病毒作为参比溶瘤病毒)ganran，检测上清液中细胞因子白细胞介素-2和γ-干扰素的浓度，并计算溶瘤病毒的细胞因子促表达能力，浙江溶瘤病毒检测技术指导，浙江溶瘤病毒检测技术指导，浙江溶瘤病毒检测技术指导。检测结果见表3。表1由表1可以看出，ndv溶瘤病毒及prostatak溶瘤病毒在a549细胞系和肺ai类***中均可以复制扩增，但是ndv溶瘤病毒及prostatak溶瘤病毒在肺ai类***中的复制水平均弱于其在a549细胞系中的复制水平，说明肺ai类***具有的zhong刘微环境能够影响溶瘤病毒在zhong刘细胞中的复制。肺ai类***中，ndv溶瘤病毒复制能力弱于prostatak溶瘤病毒；a549细胞系中，ndv溶瘤病毒复制能力优于prostatak溶瘤病毒。表2由表2可以看出，ndv溶瘤病毒及prostatak溶瘤病毒对a549细胞系和肺ai类***中的zhong刘细胞均有杀伤作用，但是ndv溶瘤病毒及prostatak溶瘤病毒对肺ai类***中的zhong刘细胞的杀伤能力均弱于其对a549细胞系中的zhong刘细胞的杀伤能力，说明肺ai类***具有的zhong刘微环境能够影响溶瘤病毒对肺ai细胞的杀伤能力。肺ai类***中。迈杰转化医学为生物标志物研究和伴随诊断开发提供科学支持，多层面助力新药研发临床试验。浙江溶瘤病毒检测技术指导

    该方法中使用的类***能够更真实模拟患者体内zhong刘异质性及药物反应情况，本检测方法建立了一种快速从溶瘤病毒复制能力、溶瘤能力及诱导宿主抗zhong刘免疫作用等三个方面评价溶瘤病毒对不同患者zhong刘溶瘤有效性的方法，可用于临床前期药物有效性测试及临床入组病人的筛选。为了实现上述目的，本公开提供一种利用类***检测溶瘤病毒有效性的方法，该方法包括：a、将溶瘤病毒与zhong刘类***混合培养12-96h，得到培养物，检测所述培养物中的溶瘤病毒的复制水平；b、将所述溶瘤病毒与zhong刘类***混合培养12-96h，得到第二培养物，检测所述第二培养物中溶瘤病毒对zhong刘细胞的杀伤率；c、将所述溶瘤病毒、免疫细胞和zhong刘类***混合培养2-8h，得到第三培养物，检测所述第三培养物中的细胞因子水平并计算所述溶瘤病毒的细胞因子促表达能力，所述细胞因子包括白细胞介素-2和/或γ-干扰素；如果待测溶瘤病毒的复制水平、对zhong刘细胞的杀伤率和细胞因子促表达能力均高于参比溶瘤病毒，则指示所述待测溶瘤病毒的有效性高于所述参比溶瘤病毒。可选地，步骤a中还包括将zhong刘类***进行预培养的步骤，然后再将预培养后的zhong刘类***与溶瘤病毒进行混合培养。辽宁提供溶瘤病毒检测郑重承诺迈杰转化医学希望能和创新型药企共同探索创新生物标志物的临床应用潜力。

    所述zhong刘类***培养液的组成可以在较宽的范围内选择，例如，本公开所述zhong刘类***培养液可以包括dmem/f12培养基和生长因子；所述生长因子可以包括glutamax、hepes、gastrin、nicotinamide、a83-01、noggin、n-acetylcysteine、青链霉素、egf和bsa中的至少一种。根据本公开，所述生长因子中各类生长因子的浓度可以在较大的范围内变化，例如，所述生长因子中，所述glutamax的浓度为％、所述hepes的浓度为5-15mm、所述gastrin的浓度为5-15nm、所述nicotinamide的浓度为5-15mm、所述a83-01的浓度为250-600ng/ml、所述noggin的浓度为50-150ng/ml、所述n-acetylcysteine的浓度为、所述青链霉素的浓度为50-150μg/ml、所述egf的浓度为50-150ng/ml、所述bsa的浓度为。根据本公开，本公开涉及的zhong刘类***的制备方法可以是本领域常规的，例如，本公开所述zhong刘类***的制备方法包括：将zhong刘细胞、温敏性水凝胶和zhong刘类***培养液混合并进行培养，每隔2-4天更换一次培养基，直至显微镜下观察到直径不小于zhong刘类***。推荐地，在上述zhong刘类***的制备方法中，相对于20000个所述zhong刘细胞，所述温敏性水凝胶的用量可以为1500-2000μl。

    δ24bp)-e1b***抑制人源化小鼠移植瘤的生长为了测试所述腺病毒的体内抑瘤效果，本实施例在人源化免疫系统的小鼠移植瘤模型中测试了其抑瘤能力。在人源化免疫系统的小鼠背部双侧皮下注射人hcc827细胞，形成移植瘤，但只对右侧**进行重组溶瘤腺病毒给药，左侧不做任何处理。结果如图4所示，测试组右侧(给药侧)移植瘤在瘤内注射重组溶瘤腺病毒rad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b后体积开始逐步缩小，实验结束时抑瘤率达到了％，***强于阳性对照药吉西他滨(图4a和b)。而令人意外的是，测试组左侧(非给药侧)移植瘤在右侧瘤内给药后体积也开始逐步缩小，实验结束时抑瘤率也达到了％的水平(图4c和d)，这说明了重组溶瘤腺病毒rad-ifn-3-sp-e1a(δ24bp)-e1b很可能整体***了体内免疫系统，从而使得杀伤**的作用并不*限于局部注射位置，而是对其他位置的**也具有极强的杀伤能力。这个效果对于*症的临床***具有不可估量的价值。实施例6rad-ifn-3-sp-e1a(△24bp)-e1b能够有效防止**复发为了了解本发明溶瘤腺病毒的***效果持续时间，选取实施例3中经瘤内注射rad-ifn-3-sp-e1a(△24bp)-e1b使移植瘤全部消退的hcc827裸鼠移植瘤模型小鼠再次单侧注射2×106个hcc827**细胞进行成瘤实验。迈杰转化医学为客户提供生物标记物发现、 靶点验证、伴随诊断开发与商业化、患者用药指导等一体化解决方案。

    2、检测ganranzhong刘类***中zhong刘细胞后的溶瘤病毒的复制水平在6孔板中接种zhong刘类***细胞悬液，以使zhong刘细胞的数量为6000个/孔，其中，每孔含500μlcosmo温敏性水凝胶及zhong刘类***培养液；将接种后的6孔板放入37℃的恒温培养箱中预培养96小时后取出，使用(将新城疫病毒ndv溶瘤病毒作为待测溶瘤病毒，将腺病毒prostatak溶瘤病毒作为参比溶瘤病毒)分别ganranzhong刘类***24，48和72小时；收集类***细胞和培养产生的细胞上清，冻融3次，离心收集上清，得到待测病毒液；在96孔板中接种溶瘤病毒的宿主细胞(如新城疫病毒ndv的宿主细胞为df1细胞)悬液(100μl/孔)，放入培养箱预培养24小时；将待测病毒液10倍比稀释(10-1-10-11)，并分别加入96孔板的每列，每个稀释梯度的病毒8个复孔，继续37℃培养5～7天后观察病变，计算病毒滴度，滴度用reed-muench两氏法精确算出。测试结果如表1。3、检测溶瘤病毒对zhong刘类***中zhong刘细胞的杀伤率在96孔板中接种zhong刘类***细胞悬液，以使每孔中含有400-700个zhong刘细胞，其中，每孔含40μlcosmo温敏性水凝胶及150μl类***培养液；将接种后的96孔板放入培养箱预培养96小时后取出，使用。迈杰多平台的研究优势以及多组学数据的挖掘能力，促进产学研医结合，加速项目成果转化，创新科技产品研发。辽宁提供溶瘤病毒检测郑重承诺

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    然后检测所述待测病毒在所述宿主细胞中的病毒滴度；其中，所述待测病毒在所述宿主细胞中的病毒滴度越高，所述***培养物中的溶瘤病毒的复制水平越高。可选地，步骤a1中，所述获取所述***培养物中的溶瘤病毒，得到待测病毒，包括：将所述***培养物进行冻融处理2-8次，然后进行离心并收集上清液，得到待测病毒液，所述待测病毒液中含有所述待测病毒。可选地，步骤b中，利用cck8试剂盒检测所述第二培养物中溶瘤病毒对**细胞的杀伤率；步骤c中，利用elisa试剂盒检测所述第三培养物中的细胞因子水平。可选地，步骤c中所述免疫细胞从患者外周血中分离得到。可选地，步骤a、步骤b和步骤c中所述的混合培养在**类***培养液中进行，所述**类***培养液包括dmem/f12培养基和生长因子；所述生长因子包括glutamax、hepes、gastrin、nicotinamide、a83-01、noggin、n-acetylcysteine、青链霉素、egf和bsa中的至少一种。可选地，所述生长因子中。浙江溶瘤病毒检测技术指导

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