培养基的性能测试:外观控制:制备好的培养基应有相应的颜色,一般的培养基应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化,是否蒸发/脱水。污染控制:从每批制备好的培养基中选取部分进行污染测试(空白试验),确定无微生物生长方可使用。同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,嘉兴培养基制备器生产厂家,嘉兴培养基制备器生产厂家,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,很终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放,嘉兴培养基制备器生产厂家、以防发生混乱。组合培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。嘉兴培养基制备器生产厂家
配制培养基的原则:根据培养目的需要选择适宜的营养物质。由于微生物营养类型复杂,不同微生物有不同的营养要求。因此,要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质,配制针对性强的培养基。自养微生物有较强的合成能力,能以简单的无机物如co2和无机盐合成复杂的细胞物质。因此,培养自养微生物的培养基应由简单的无机物组成。异养微生物的合成能力较弱,不能以CO2作为碳源或主要碳源,故应在培养基中至少添加一种有机物。注意营养物质的浓度与配比要合适:微生物只有在营养物质浓度及其比例合适时才能良好生长。营养物质浓度过低不能满足现生长需要,过高又抑制其生长。例如,适量的蔗糖是异养微生物的良好碳源和能源,但高浓度蔗糖则抑制菌体生长。金属离子是微生物生长所不可缺少的矿质养分,但浓度扩大,尤其是重金属离子,反而抑制其生长,甚至产生杀菌作用。常州培养基制备器供应商培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要。
培养基的配制:分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角瓶:若作静置培养,则100 ml培养基/250 ml的三角瓶,很多不能超过150 ml培养基/250 ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15~20 ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。试管分装:液体培养基一般装4~5 ml,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3~4 ml,约试管的1/5高度。包扎:分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌:按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面:灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。贮存:培养基在30℃下放置,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。
简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:需要选择培养基配方,同一种培养基,其表达方式往往存在着差异。所以,除了应当严格按照标准方法的规定编制之外,我们一般应尽可能收集有关数据,加以比较和核对,然后根据自己的目的选择和记录数据来源。需记录培养基的制备,培养基的制备记录包括培养基的名称、配方及其来源、pH值、灭菌温度、时间、配制日期、制备人等,并且要复印记录和保存原始记录备查。对副本的记录应该和培养基一起保存,以防出现混乱。需称重培养基的成分,培养基成分要准确称量,并注意防止混淆。每一种成分称量完毕后,都要在分装的一面打上记号,然后将分装的药物一起放在左边。每一个成分称量完之后,都会向右移动。全部称量完毕,应再次检查。全自动培养基制备仪主要特点:外部管口连接处可直接喷灯消毒。
培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项:确认工作细胞库是否被污染,确认毒种工作种子批是否被污染,确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用细菌、及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。其它:高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证,确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证,后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外,应将有毒区与无毒区严格分开,并有各自独自的空气净化系统及孵室,有毒区对无毒区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。制备培养基的操作要点:易于控制微生物的生长代谢状态。常州培养基制备器供应商
根据培养基的特殊用途可分为基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基等。嘉兴培养基制备器生产厂家
培养基配置原则:灭菌处理,要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中,长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖,因此含糖培养基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分钟进行灭菌,某些对糖类要求较高的培养基,可先将糖进行过滤除菌或间歇灭菌,再与其他已灭菌的成分混合;长时间高温还会引起磷酸盐、碳酸盐与某些阳离子(特别是钙、镁、铁离子)结合形成难溶性复合物而产生沉淀。嘉兴培养基制备器生产厂家
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