微生物检验培养基制备的要点:培养基摆斜面,灭菌完成后,将试管中的中海琼脂培养基放在木棒或玻璃棒上,同时它很热,并且有适当的坡度。冷却后使琼脂凝固并变成斜面。斜面长度不超过试管的二分之一。微生物培养基质检,检验培养基灭菌后,深圳培养基制备器生产厂家,发现有破损,浸水,颜色异常,棉塞被培养基污染。所有这些都必须丢弃,不能重复使用,并确定其很终pH值,深圳培养基制备器生产厂家。 无菌检查和效果检查也是必需的。无菌检查是取1~2瓶无菌培养基,37℃孵育一两天,确认无细菌生长;效果检查是将标准菌株接种到相关培养基上进行细菌检查。 动物的生长、形态和生化条件与已知条件一致。两个条件都合格,准备好的培养基就可以使用了,深圳培养基制备器生产厂家。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性。深圳培养基制备器生产厂家
简单制作培养基,需调整培养基成分,介质中使用的化学物质应该是化学纯品,铜锅或铁锅易导致铜、铁混入培养基,使细菌难以繁殖。用不锈钢锅加热溶解较为适宜。溶解于水的锅子,可用温水加热,随时搅拌,防止结焦。若发现结焦,则不能使用介质,需重新调配。在溶解大多数固体成分之后,用少量热将其全部溶解,直到沸腾。简单制作培养基,需调整培养基的pH值,由于加热消毒过程中培养基的 pH值会发生变化,因此应在培养基组分完全溶解后,调整 pH值。举例来说,牛肉汁的 pH值下降了0.2左右,而肠浸出物的 pH值则明显上升。所以,在这一步中,操作者要注重不断探索经验,掌握培养基的很终 pH值,保证培养基的质量。在调整 pH值后,要将其煮沸几分钟,以利于培养基沉淀。济南培养基制备器哪家好培养基配成后一般需测试并调节pH,还须进行灭菌,通常有高温灭菌和过滤灭菌。
微生物检验培养基制备的要点:称取数量,用1/100的电子天平称出培养基所需的药物。首先参照配方计算出配制相应培养基需要各成分的数量,然后用电子天平准确称取重量(将称量纸折叠成簸箕盛药)。培养基过滤,如果对配制的培养基没有特殊要求,这一步可以省略。中'海培养基如有浑浊和沉淀现象,可将需要澄清的液体培养基用油纸过滤。固体介质可以用双层纱布过滤,中间有一层薄薄的脱脂棉。 如果过滤法不能满足澄清要求,可以采用蛋清澄清法,即将培养基加热冷却至五十度至六十度,不超过三角瓶一半的容量。每一千毫升放入1~2个蛋清,用力摇晃三至五分钟,用121℃高压蒸汽灭菌二十分钟,趁热取出过滤。
培养基配制:配制用水,培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基:培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清:培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。根据培养基的特殊用途可分为基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基等。
培养基是生物制品领域中常用的物质,在细菌和细胞培养中十分必要,但是现有技术中有些培养基的某种组份容易分解,造成保存时间短等问题,导致培养基的使用成本十分高。其中,在动物培养基中,谷氨酰胺是一种必要的组份,但是在常温下,很短的时间内,约7-10日中培养基中的谷氨酰胺成份就可降解90%以上,这给其商品化带来很大的困难。这样的培养基在现有技术中很多,都具有上述的缺陷,例如,中国CN1087778C公开了一种杂交瘤细胞的无血清培养基,其中包含有谷氨酰胺成份,但是这种培养基的保存时间十分有限,很难达到商业使用的目的。培养基pH值的调正:pH因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化。济南培养基制备器哪家好
分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。深圳培养基制备器生产厂家
基础培养基各种微生物的营养要求虽不相同,但多数微生物需要的基本营养物质相同。按一般微生物生长繁殖所需要的基本营养物质配制的培养基即成为基础培养基。牛肉膏蛋白胨培养基就是很常用的基础培养基,它可作为一些特殊培养基的基本成分,再根据某种微生物的特殊要求,在基础培养基中添加所需营养物质。根据培养基的特殊用途可分为基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基等。基础培养基:含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质,可供大多数细菌生长。在牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐,调节 pH7.2~7.6,经灭菌处理后,即为基础液体培养基;如再加入0.3%~0.5%的琼脂,则为基础半固体培养基;加入1%~2%的琼脂,则为基础固体培养基。牛肉膏蛋白胨培养基就是很常用的基础培养基,它可作为一些特殊培养基的基本成分,再根据某种微生物的特殊要求,在基础培养基中添加所需营养物质。深圳培养基制备器生产厂家
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