胶体金免疫层析(GICA)技术是20世纪90年代初在免疫渗滤技术基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术。胶体金免疫层析(GICA)作为一种可靠的免疫学检测技术,其特异性强、灵敏度高、简便快速、无需特殊仪器设备,在动物检验检疫实际工作中有较强应用价值。目前国内已有少量兽医用商品GICA检测条生产(如瘦肉精检测条、鸡法氏囊、猪旋毛虫和新城疫检测条等),黑龙江金标读数仪在线议价。如果加大研究开发力度,黑龙江金标读数仪在线议价,黑龙江金标读数仪在线议价,可望将GICA技术用于各种疾病的快速诊断和检测,为实现我国动物检验检疫工作的科学化、标准化和快捷化具有重要意义。无锡天纵易骏可大量供应读数仪 欢迎咨询。黑龙江金标读数仪在线议价
免疫胶体金的制备1、制备胶体金标记蛋白质应注意的问题(1)蛋白质的预处理。蛋白质应先对低离子强度的水透析,去除盐类成分。用微孔滤膜或超速离心除去蛋白质溶液中的细小微粒。(2)低盐浓度的缓冲液。过量盐可使金颗粒发生凝集。(3)当PH接近于蛋白质等电点或略偏碱性。蛋白质所处溶解状态较适合偶联,蛋白质分子在金颗粒表面的吸附量较大。(4)蛋白质适用量的选择:能使胶体金稳定的合适蛋白量再加10%即为zui佳标记蛋白量。(5)胶体金与蛋白质偶联后,加入稳定剂,以避免产生凝集。一般选用PEG(分子量为20000)和牛血清白蛋白作稳定剂。2、常见方法(1)用。(2)加入zui佳标记量的蛋白质溶液,搅拌2~3分钟。(3)加入5ml1%PEG20000溶液。(4)于10000~100000g离心,小心吸去上清液。(5)将沉淀悬浮于一定的缓冲液中,离心沉淀后,再用同一缓冲液恢复,浓度以A1cm/540nm=,置4℃保存。 湖北手持式胶体金读数仪零售价格无锡天纵易骏供应读数仪 ,欢迎新老客户来电!
胶体金的稳定性溶胶的稳定性介于小分子离子溶液和粗分散相之间,其颗粒作布朗运动,不易受重力影响而下沉。然而,溶胶又是不稳定体系,它的胶粒溶剂化作用很弱,总面积较大、因在胶粒相互碰撞时,有自动合并为较大、较重的颗粒倾向。当胶体颗粒直径变大,超出胶体范围而从介质中沉淀出来的现象叫聚沉。影响其稳定性的主要原因有三点。(1)胶粒间的相互吸引力当胶粒相距很近时,这种吸引力可能导致胶体颗粒合并而变大。(2)胶粒及其溶剂化层胶粒及其溶剂化层(溶剂是水时就是水化层)的带电情况。一种溶胶的各个胶粒都带有相同的电荷。同性电荷相斥,双电子层变厚,胶粒带电量愈大,排斥力愈大,愈能阻止胶粒合并聚结,溶胶愈稳定。(3)胶体接口的溶剂膜当二个固体间夹有一厚层液体时,这层液体膜有一个反抗二固体接近的排斥力。两个胶粒要进一步接近,只有克服它们之间的溶剂化膜的斥力才有可能,因此溶剂膜的斥力是使溶胶稳定的原因之一。
胶体金溶液是指分散相粒子直径在l—150 nm之间的金溶胶,属于多相不均匀体系,颜色呈桔红色到紫红色.胶体金作为标记物用于免疫组织化学始于1971年,Faulk等应用电镜免疫胶体金染色法(IGS)观察沙门氏菌,此后他们把胶体金与多种蛋白质结合.1974年Romano等将胶体金标记在第二抗体(马抗人IgG)上,建立了间接免疫胶体金染色法。1978年geoghega发现了胶体金标记物在光镜水平的应用。胶体金在免疫化学中的这种应用,又被称为免疫金.之后,许多学者进一步证实胶体金能稳定又迅速地吸附蛋白质,而蛋白质的生物活性无明显改变.它可以作为探针进行细胞表面和细胞内多糖、蛋白质、多肤、抗原、核酸等生物大分子的精确定位,也可以用于日常的免疫诊断,进行免疫组织化学定位,因而在临床诊断及药物检测等方面的应用已受到重视.目前电镜水平的免疫金染色(IGS),光镜水平的免疫金银染色(IGSS),以及肉眼水平的斑点免疫金染色技术日益成为科学研究和临床诊断的有力工具.分别测试反射率范围为[0.2,0.8]内高、中、低反射率的3条质控条,CV≤3%。
胶体金标记蛋白质的分离纯化:各种方法所得到的胶体金颗粒直径,是大多数颗粒的平均直径。实际工作中所得到的胶体金,是各种近似直径颗粒的混合体,标记过程中,并不是所有金颗粒都可以得到稳定。因此,胶体金标记蛋白质后,必须进行分离纯化,以除去未参与标记的过量蛋白质、未稳定的金颗粒及各种可能形成的聚合物。在胶体金标记蛋白质过程中,除严格控制胶体金的制备工艺外,标记后选择合适的纯化方法十分关键。金标蛋白质的分离纯化与同位素、荧光素、发光剂及酶标抗体的纯化方法不同,其主要特点是金标蛋白质的质量大,并以溶胶形式存在,对纯化过程中的pH值、离子强度变化及某些杂质等因素较为敏感,不易采用盐析、离子交换、亲合层析等常规方法进行分离。目前主要采用超速离心和凝胶过滤两种纯化方法。适用于胶体金免疫层析试纸条样品的检测。云南单通道胶体金读数仪批发价
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免疫胶体金的应用1、胶体金在光镜水平、电镜水平的应用直径为3~15nm胶体金均可用作电镜水平的标记物。优点是可以通过应用不同大小的颗粒进行双重或多重标记。胶体金用于光镜水平、电镜水平的研究,主要包括:①细胞悬液或单层培养中细胞表面抗原的观察。②单层培养中细胞内抗原的检测。③组织切片中抗原的检测。2、胶体金在流式细胞仪中的应用应用胶体金标记的抗体,分析细胞表面抗原。胶体金可以明显地改变红激光散射角,区分不同的标记,能同时进行几种标记。3、凝集试验单分散的免疫金溶胶清澈透明。与相应抗原或抗体发生专一性反应后出现凝聚,溶胶颗粒增大、沉降,光散射随之发生变化,溶液的颜色发生变化。4、免疫印迹技术用聚丙烯酰胺凝胶电泳将蛋白质分离,得到的区带转移至硝酸纤维素膜,与特异性的抗体保温后,再与胶体金标记物温育,根据膜上胶体金颗粒颜色深浅可测知样品中的特异性抗原。金免疫印迹技术有相当高的灵敏度。采用免疫金银染色法,灵敏度可低至。 黑龙江金标读数仪在线议价
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