胶体金蛋白结合物的质量鉴定(1)胶体金颗粒平均直径的测量:用支持膜的镍网(铜网也可)蘸取金标蛋白试剂,自然干燥后直接在透射电镜下观察。或用醋酸铀复染后观察。计算100个金颗粒的平均直径。(2)胶体金溶液的OD520nm值测定:胶体金颗粒在波长510nm~550nm之间出现*大吸收值峰。用(含1%BSA,中国台湾读数仪代理商,%NaN3)将胶体金蛋白试剂作1︰20稀释,中国台湾读数仪代理商,OD520=。一般应用液的OD520应为~。(3)金标记蛋白的特异性与敏感性测定:采用微孔滤膜免疫金银染色法(MF-IGSSA)。将可溶性抗原(或抗体)吸附于载体上(滤纸、硝酸纤维膜、微孔滤膜),中国台湾读数仪代理商,用胶体金标记的抗体(或抗原)以直接或间接染色法并经银显影来检测相应的抗原或抗体,对金标记蛋白的特异性和敏感性进行鉴定。 **的光电一体化解决方案,保障了优良的检测重复性。中国台湾读数仪代理商
胶体金免疫层析是当前新兴的一种结合免疫分析技术、侧向层析技术、胶体金标记技术的快速检测手段。胶体金免疫层析试纸条主要根据抗原或抗体与胶体金特异性结合后所呈现出的颜色深浅而得出待检测液浓度,从而实现定性和定量检测。
胶体金免疫层析的实现得益于胶体金的显色。胶体金是金氯酸(HAuCl4)被还原后形成的金颗粒,在弱碱性环境下因表面吸附了AuCl4-和H+等离子而带有负电荷。这些负电荷与蛋白质分子中的正电荷基团结合形成免疫胶体金。 黑龙江金标胶体金读数仪可应用于海关检验检疫、环境监测、食品安全、临床诊断、药物筛选、重大疾病诊断检测等。
胶体金在电镜水平的应用:胶体金应用电镜水平的研究早,发展快,应用多。其优点是可以通过应用不同大小的颗粒或结合酶标进行双重或多重标记。直径为3~15nm 胶体金均可用作电镜水平的标记物。3~15nm 的胶体金多用于单一抗原颗粒的检测,而直径15nm 多用于检测量较多的*染细胞。胶体金用于电镜水平的研究,主要包括:细胞悬液或单层培养中细胞表面抗原的观察。单层培养中细胞内抗原的检测。组织抗原的检测。 胶体金在光镜水平的应用:胶体金同样可用做光镜水平的标记物,取代传统的荧光素、酶等。各种细胞涂片、切片均可应用。主要用于:用单克窿抗体或抗血清检测细胞悬液或培养的单层细胞的膜表面抗原。检测培养的单层细胞胞内抗原,组织中或亚薄切片中抗原的检测。
胶体金读数仪适用于胶体金免疫层析试纸条样品的检测。采用现代光电技术,用光电传感器测量反射光强度,定量或定性分析金标试纸颜色深浅,从而计算被测物含量或浓度。通过仪器辨别试纸条颜色变化,能够避免人为判读所造成的主观误差,并快速地提供检测结果,具有很高的准确性和重复性。可广泛应用于海关检验检疫、环境监测、食品安全、临床诊断、药物筛选、重大疾病诊断检测等。适用范围:医疗:传染性疾病、自身免疫等海关:检验检疫农业:食品安全、细菌污染、农药残留等环境:环境监测科研:新产品开发胶体金免疫层析(GICA)技术是20世纪90年代初在免疫渗滤技术基础上建立的一种简易快速的免疫学检测技术。
胶体金的质量鉴定:一、胶体金颗粒直径测定:用预先处理好的覆有Formvar膜的镍网浸入胶体金溶液内,取现放在空气中干燥或37℃烤箱烤干。然后在透射电镜下观察,主要观察金颗粒的大小,符合不符合所需要的颗粒直径,金颗粒是否均匀一致,有无椭圆形及多角形金颗粒存在。理想的金颗粒是大小基本相等,均匀一致,无椭圆形及多角形的金颗粒存在,还可以拍片放大后测量金颗粒直径的大小。二、胶体金金颗粒均匀度测定:一般需测量100个以上的胶体金颗粒,然后用统计学处理,计算胶体金颗粒的平均直径及标准差,前者反映颗粒的大小,后者说明颗粒是否均匀一致。三、影响胶体金颗粒大小的因素:如果有较多的大小不等的金颗粒及有椭圆形,三角形金颗粒存在应重新制备。一般造成这种情况的主要原因是在加还原剂的时候不是迅速一次加入,而是多次加入。再者搅拌不均匀,速度太慢没有搅拌起来,造成了颗粒大小不等。制备量的多少,容器的大小,加热的时间等也影响胶体金颗粒的大小。制备了合格的胶体金以后,放在室温或4℃保存。避免低温冻存,因为冻存可导致胶体金凝集,破坏了胶体状态。胶体金在室温避光无灰尘的环境中可放置3个月左右。冰箱内半年左右。胶体金标记 吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。辽宁自动化读数仪代理商
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胶体金的稳定性溶胶的稳定性介于小分子离子溶液和粗分散相之间,其颗粒作布朗运动,不易受重力影响而下沉。然而,溶胶又是不稳定体系,它的胶粒溶剂化作用很弱,总面积较大、因在胶粒相互碰撞时,有自动合并为较大、较重的颗粒倾向。当胶体颗粒直径变大,超出胶体范围而从介质中沉淀出来的现象叫聚沉。影响其稳定性的主要原因有三点。(1)胶粒间的相互吸引力当胶粒相距很近时,这种吸引力可能导致胶体颗粒合并而变大。(2)胶粒及其溶剂化层胶粒及其溶剂化层(溶剂是水时就是水化层)的带电情况。一种溶胶的各个胶粒都带有相同的电荷。同性电荷相斥,双电子层变厚,胶粒带电量愈大,排斥力愈大,愈能阻止胶粒合并聚结,溶胶愈稳定。(3)胶体接口的溶剂膜当二个固体间夹有一厚层液体时,这层液体膜有一个反抗二固体接近的排斥力。两个胶粒要进一步接近,只有克服它们之间的溶剂化膜的斥力才有可能,因此溶剂膜的斥力是使溶胶稳定的原因之一。 中国台湾读数仪代理商
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