标记:胶体金与蛋白质(IgG)的结合:将胶体金和IgG溶液分别以,电磁搅拌IgG溶液,加入胶体金溶液,继续搅拌10min,加入一定量的稳定剂以防止抗体蛋白与胶体金聚合发生沉淀。常用稳定剂是5%胎牛血清(BSA)和1%聚乙二醇(分子量20KD)。加入量:5%BSA使溶液终浓度为1%;1%聚乙二醇加至总溶液的1/10,内蒙古胶体金检测读数仪市场价.在接近并略为高于蛋白质等电点的条件下标记是比较合适的,在此情况下蛋白质分子在金颗粒表面的吸附量大。步骤:①用0、1mol/LK2CO3或(标记SPA时调到),内蒙古胶体金检测读数仪市场价。②于100ml金溶胶中加入合适标记量的蛋白质溶液(体积为2~3ml),搅拌2~3分钟。③加入5ml1%PEG20000溶液。④于10000~100000g离心30~60分钟(根据粒径大小选择不同离心条件),小心吸去上清液(切忌倾倒)。⑤将沉淀悬浮于一定体积含~,离心沉淀后,再用同一缓冲液恢复,内蒙古胶体金检测读数仪市场价,浓度以A1cm/540nm=,以,置4℃保存。⑥包被后的金溶胶也可浓缩后于SephadexG-200柱进行凝胶层析分离纯化,以含%BSA的缓冲溶液洗通常用IgG包被的金溶胶洗脱液pH为。 台式或便携式胶体金读数仪,提供客户选择。内蒙古胶体金检测读数仪市场价
Vakirs等于1985年建立了金标免疫滲滤技术,该技术原理是:先用胶体金标记二抗,随后将抗原物质包被于醋酸纤维素或硝酸纤维束膜,后采用特定形状的塑料卡盒及吸水滤纸等组装垂直渗滤装置。反应过程是;先将检测样品(血清)加在反应膜上,若样品中存在被检特异性抗体,则检测样品快速渗滤通过反应膜时,样品中的特异性抗体就会与包被于反应膜上的抗原结合,随后用缓冲液渗滤洗去样品中剩余的物质,再将金标二抗加于反应膜表面,当金标二抗在反应膜的渗滤过程中,金标二抗就会与结合于反应膜上的特异性抗体结合,再用缓冲液渗滤洗去未结合的金标二抗。此时,反应膜上会显示出红色的点。若样品中没有被检特异性抗体,则抗原抗体连锁反应不成立,金标二抗不会留在反应膜,也就不会出现红色的点。由于金标免疫渗滤技术操作简单,反应速度快,2-3分钟出现结果,特异性强,敏感性高,此项技术自诞生之日期,备受业界高度关注。Spielberg等于1989年建立了人类免疫缺陷病毒抗体检测金标免疫渗滤检测技术。金标免疫渗滤技术现已应用于医学临床检验,疫病预防、动物疫病防控,食品安全检测及农业病虫害检测等领域。金标渗滤法的缺陷是金标抗体有效期短,一般为6个月。甘肃胶体金快速定量读数仪零售价格无锡天纵易骏可大量供应各类公司读数仪 欢迎咨询。
胶体金标记蛋白质的分离纯化:各种方法所得到的胶体金颗粒直径,是大多数颗粒的平均直径。实际工作中所得到的胶体金,是各种近似直径颗粒的混合体,标记过程中,并不是所有金颗粒都可以得到稳定。因此,胶体金标记蛋白质后,必须进行分离纯化,以除去未参与标记的过量蛋白质、未稳定的金颗粒及各种可能形成的聚合物。在胶体金标记蛋白质过程中,除严格控制胶体金的制备工艺外,标记后选择合适的纯化方法十分关键。金标蛋白质的分离纯化与同位素、荧光素、发光剂及酶标抗体的纯化方法不同,其主要特点是金标蛋白质的质量大,并以溶胶形式存在,对纯化过程中的pH值、离子强度变化及某些杂质等因素较为敏感,不易采用盐析、离子交换、亲合层析等常规方法进行分离。目前主要采用超速离心和凝胶过滤两种纯化方法。
胶体性质胶体金颗粒大小多在1~100nm,微小金颗粒稳定地、均匀地、呈单一分散状态悬浮在液体中,成为胶体金溶液。胶体金因而具有胶体的多种特性,特别是对电解质的敏感性。电解质能破坏胶体金颗粒的外周永水化层,从而打破胶体的稳定状态,使分散的单一金颗粒凝聚成大颗粒,而从液体中沉淀下来。某些蛋白质等大分子物质有保护胶体金、加强其稳定性的作用。呈色性微小颗粒胶体呈红色,但不同大小的胶体呈色有一定的差别。小的胶体金(2~5nm)是橙黄色的,中等大小的胶体金(10~20nm)是酒红色的,较大颗粒的胶体金(30~80nm)则是紫红色的。根据这一特点,用肉眼观察胶体金的颜色可粗略估计金颗粒的大小。近10多年来胶体金标记已经发展为一项重要的免疫标记技术.胶体金免疫分析在药物检测、生物医学等许多领域的研究已经得到发展,并越来越受到相关研究领域的重视.光吸收性胶体金在可见光范围内有一单一光吸收峰,这个光吸收峰的波长(λmax)在510~550nm范围内,随胶体金颗粒大小而变化,大颗粒胶体金的λmax偏向长波长,反之,小颗粒胶体金的λmax则偏于短波长,表1所列为部分胶体金的λmax。无锡天纵易骏为您讲解读数仪 知识。
目前胶体金试纸条的定量检测方法有以下几种:1、利用光敏电阻采集试纸条反射光强度来读取试纸条信息。该方法利用光敏电阻受到光的辐射后电导率会发生相应的变化的特性来获取试纸条中的相关信息,但光敏电阻的前历效应和纤维素膜上的水和胶体金均对信号干扰较大。2、利用反射型光纤传感器测量试纸条。在入射光纤的作用下光照射在试纸条上,光纤传感器对试纸条进行扫描,光探测器收集光纤采集到的试纸条表面的反射光并转换成电信号,电信号的大小反应了试纸条对于位置的反射光的强弱。但入射光照射的不全性,试纸条生产工艺的差异性均会影响检测结果的稳定。快捷的仪器校准方案。江西手持式胶体金读数仪市场价
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溶胶的聚沉现象胶粒之间存在吸引力与排斥力这对矛盾,在溶胶胶粒带电及溶剂化的情况下,排斥力成为矛盾的主要方面,溶胶稳定而不聚沉。因为某种原因使溶胶粒带电量减到很小,甚至中和其所带电荷并能去溶剂化膜,胶粒之间可在更近的距离互相接近,引力成为主要矛盾,引力超过斥力时胶粒便聚结发生聚沉。引起溶胶聚沉的原因有。(1)少量电解质对溶胶的聚沉作用少量电解质即可使溶胶聚沉,但各种电解质的聚沉能力可用聚沉值来表示。聚沉值是在一定时间内使1L某浓度的溶胶产生聚沉所需电解质的zui小物质的量(mm01)。显然,聚沉值愈小,聚沉能力愈大。聚沉值从实验中得出如下的规则:①电解质负离子对带正电的溶胶起主要聚沉作用,正离子对带负电的溶胶起主要聚沉作用;②同价离子聚沉能力几乎相等,不同价离子的聚沉能力随离子价增加而明显增加。电解质能使溶胶聚沉是由于电解质与胶粒带相反电荷离子的作用,中和了胶粒所带的一部分电荷,使胶粒电量减少,扩散层缩小,溶剂化层变薄,而当双电子层厚度缩至很小和溶剂化层变得很薄时,两个质粒间便可以更加接近,即不产生斥力,两个胶粒间因引力加大而合并的趋势增强,甚至引力占优势以致使胶粒聚结而发生聚沉。 内蒙古胶体金检测读数仪市场价
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